රිදී නයිට්‍රේට් කණ්නාඩි වල ප්‍රති-ජෛව පටල බලපෑම සහ සුව කිරීම උත්තේජනය කිරීම.

Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තූතියි. ඔබ භාවිතා කරන බ්‍රව්සර් අනුවාදයේ සීමිත CSS සහාය ඇත. හොඳම ප්‍රතිඵල සඳහා, ඔබගේ බ්‍රව්සරයේ නවතම අනුවාදයක් භාවිතා කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු (නැතහොත් Internet Explorer හි අනුකූලතා ප්‍රකාරය අක්‍රීය කරන්න). මේ අතරතුර, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි මෝස්තරයක් හෝ JavaScript නොමැතිව අඩවිය ප්‍රදර්ශනය කරන්නෙමු.
තුවාලවල ක්ෂුද්‍රජීවී වර්ධනය බොහෝ විට ජෛව පටල ලෙස ප්‍රකාශ වන අතර, ඒවා සුව කිරීමට බාධා කරන අතර මුලිනුපුටා දැමීමට අපහසු වේ. නව රිදී ආලේපන තුවාල ආසාදන වලට එරෙහිව සටන් කරන බව ප්‍රකාශ කරයි, නමුත් ඒවායේ ප්‍රතිජීවක පටල කාර්යක්ෂමතාව සහ ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීමේ බලපෑම් සාමාන්‍යයෙන් නොදනී. ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් සහ සූඩොමොනාස් ඒරුගිනෝසා වල in vitro සහ in vivo ජෛව පටල ආකෘති භාවිතා කරමින්, අපි Ag1+ අයන-ජනන ඇඳුම්වල කාර්යක්ෂමතාව වාර්තා කරමු; එතිලීන් ඩයමිනෙටෙට්‍රාඇසිටික් අම්ලය සහ බෙන්සෙතෝනියම් ක්ලෝරයිඩ් (Ag1+/EDTA/BC) අඩංගු Ag1+ ආලේපන සහ රිදී නයිට්‍රේට් (Ag ඔක්සිසල්ට්) අඩංගු ආලේපන, තුවාල ජෛව පටලයට එරෙහිව සටන් කිරීම සඳහා Ag1+, Ag2+ සහ Ag3+ අයන නිපදවන අතර සුව කිරීම කෙරෙහි එහි බලපෑම. Ag1+ ආලේපන තුවාල ජෛව පටලයට in vitro සහ මීයන් තුළ අවම බලපෑමක් ඇති කළේය (C57BL/6j). ඊට වෙනස්ව, ඔක්සිජන් සහිත Ag ලවණ සහ Ag1+/EDTA/BC කණ්නාඩි මගින් ජෛව පටලවල ජීව බැක්ටීරියා සංඛ්‍යාව සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළ අතර මීයන්ගේ තුවාල ජෛව පටලවල බැක්ටීරියා සහ EPS සංරචකවල සැලකිය යුතු අඩුවීමක් පෙන්නුම් කළේය. මෙම කණ්නාඩි ජෛව පටල-ආසාදිත සහ ජෛව පටල-ආසාදිත නොවන තුවාල සුව කිරීම කෙරෙහි වෙනස් බලපෑම් ඇති කළ අතර, පාලන ප්‍රතිකාර සහ අනෙකුත් රිදී කණ්නාඩි හා සසඳන විට ඔක්සිජන් සහිත ලුණු කණ්නාඩි නැවත එපිටිලියල්කරණය, තුවාලයේ ප්‍රමාණය සහ දැවිල්ල කෙරෙහි වඩාත් හිතකර බලපෑම් ඇති කළේය. රිදී කණ්නාඩි වල විවිධ භෞතික රසායනික ගුණාංග තුවාල ජෛව පටල සහ සුව කිරීම කෙරෙහි වෙනස් බලපෑම් ඇති කළ හැකි අතර, ජෛව පටල-ආසාදිත තුවාල සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා කණ්නාඩියක් තෝරාගැනීමේදී මෙය සලකා බැලිය යුතුය.
නිදන්ගත තුවාල "ක්‍රමවත් හා කාලෝචිත ආකාරයකින් සුව කිරීමේ සාමාන්‍ය අවධීන් හරහා ඉදිරියට යාමට අපොහොසත් වන තුවාල" ලෙස අර්ථ දැක්වේ. නිදන්ගත තුවාල රෝගීන්ට සහ සෞඛ්‍ය සේවා පද්ධතියට මානසික, සමාජීය සහ ආර්ථික බරක් ඇති කරයි. තුවාල සහ ඒ ආශ්‍රිත රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා වාර්ෂික NHS වියදම 2017–182 දී පවුම් බිලියන 8.3 ක් ලෙස ඇස්තමේන්තු කර ඇත. නිදන්ගත තුවාල දැනට එක්සත් ජනපදයේ ද දැවෙන ගැටලුවක් වන අතර, Medicare තුවාල සහිත රෝගීන්ට ප්‍රතිකාර කිරීමේ වාර්ෂික පිරිවැය ඩොලර් 28.1–ඩොලර් බිලියන 96.83 ලෙස ඇස්තමේන්තු කර ඇත.
තුවාල සුවවීම වළක්වන ප්‍රධාන සාධකයක් වන්නේ ආසාදනයයි. ආසාදන බොහෝ විට ජෛව පටල ලෙස ප්‍රකාශ වන අතර, ඒවා සුව නොවන නිදන්ගත තුවාල වලින් 78% ක් තුළ දක්නට ලැබේ. ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් තුවාල මතුපිට වැනි මතුපිටට ආපසු හැරවිය නොහැකි ලෙස සම්බන්ධ වූ විට ජෛව පටල සෑදෙන අතර බාහිර සෛලීය පොලිමර් (EPS) නිපදවන ප්‍රජාවන් සෑදීමට එකතු විය හැකිය. තුවාල ජෛව පටලය පටක හානිවලට තුඩු දෙන වැඩිවන ගිනි අවුලුවන ප්‍රතිචාරයක් සමඟ සම්බන්ධ වන අතර එමඟින් සුවවීම ප්‍රමාද කළ හැකිය හෝ වළක්වා ගත හැකිය4. පටක හානි වැඩිවීමට හේතු විය හැක්කේ අනුකෘති මෙටලෝප්‍රෝටීනේස්, කොලජනේස්, ඉලාස්ටේස් සහ ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඔක්සිජන් විශේෂ 5 හි ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි වීමයි. එපමණක් නොව, ගිනි අවුලුවන සෛල සහ ජෛව පටල ඔක්සිජන් අධික ලෙස පරිභෝජනය කරන අතර එම නිසා දේශීය පටක හයිපොක්සියා ඇති කළ හැකි අතර, ඵලදායී පටක අලුත්වැඩියාව සඳහා අවශ්‍ය අත්‍යවශ්‍ය ඔක්සිජන් සෛල ක්ෂය කරයි6.
පරිණත ජෛව පටල ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශක කාරක වලට බෙහෙවින් ප්‍රතිරෝධී වන අතර, ජෛව පටල ආසාදන පාලනය කිරීම සඳහා ආක්‍රමණශීලී උපාය මාර්ග අවශ්‍ය වේ, උදාහරණයක් ලෙස යාන්ත්‍රික ප්‍රතිකාර හා ඵලදායී ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී ප්‍රතිකාර. ජෛව පටල ඉක්මනින් පුනර්ජනනය කළ හැකි බැවින්, ඵලදායී ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශක මගින් ශල්‍යකර්මයෙන් පසු නැවත සෑදීමේ අවදානම අඩු කළ හැකිය7.
රිදී ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී ආලේපන සඳහා වැඩි වැඩියෙන් භාවිතා වන අතර නිදන්ගත ආසාදිත තුවාල සඳහා පළමු පෙළ ප්‍රතිකාරයක් ලෙස බොහෝ විට භාවිතා වේ. වාණිජමය වශයෙන් ලබා ගත හැකි රිදී ආලේපන රාශියක් ඇත, ඒ සෑම එකක්ම වෙනස් රිදී සංයුතියක්, සාන්ද්‍රණයක් සහ පාදක අනුකෘතියක් අඩංගු වේ. රිදී ආලේපනවල දියුණුව නව රිදී ආලේපන වර්ධනයට හේතු වී ඇත. රිදී (Ag0) වල ලෝහමය ස්වරූපය නිෂ්ක්‍රීය වේ; ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී කාර්යක්ෂමතාව ලබා ගැනීම සඳහා, එය අයනික රිදී (Ag1+) සෑදීමට ඉලෙක්ට්‍රෝනයක් අහිමි විය යුතුය. සාම්ප්‍රදායික රිදී ආලේපනවල රිදී සංයෝග හෝ ලෝහමය රිදී අඩංගු වන අතර ඒවා ද්‍රවයට නිරාවරණය වූ විට දිරාපත් වී Ag1+ අයන සාදයි. මෙම Ag1+ අයන බැක්ටීරියා සෛලය සමඟ ප්‍රතික්‍රියා කරයි, ව්‍යුහාත්මක සංරචක හෝ පැවැත්ම සඳහා අවශ්‍ය තීරණාත්මක ක්‍රියාවලීන්ගෙන් ඉලෙක්ට්‍රෝන ඉවත් කරයි. පේටන්ට් බලපත්‍රලාභී තාක්ෂණය තුවාල ආලේපනවලට ඇතුළත් වන නව රිදී සංයෝගයක් වන Ag ඔක්සිසල්ට් (රිදී නයිට්‍රේට්, Ag7NO11) වර්ධනය වීමට හේතු වී ඇත. සාම්ප්‍රදායික රිදී මෙන් නොව, ඔක්සිජන් අඩංගු ලවණ වියෝජනය වීමෙන් ඉහළ සංයුජතාවයක් (Ag1+, Ag2+ සහ Ag3+) සහිත රිදී තත්වයන් ඇති වේ. Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus සහ Escherichia coli වැනි ව්යාධිජනක බැක්ටීරියා වලට එරෙහිව තනි අයන රිදී (Ag1+) වලට වඩා ඔක්සිජන් සහිත රිදී ලවණ අඩු සාන්ද්‍රණයකින් වඩාත් ඵලදායී බව in vitro අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත. තවත් නව රිදී ඇඳුමක අතිරේක අමුද්‍රව්‍ය ඇතුළත් වේ, එනම් ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) සහ benzethonium chloride (BC), ඒවා ජෛව පටල EPS ඉලක්ක කර ගන්නා බවත් එමඟින් ජෛව පටලයට රිදී විනිවිද යාම වැඩි කරන බවත් වාර්තා වේ. මෙම නව රිදී තාක්ෂණයන් තුවාල ජෛව පටල ඉලක්ක කර ගැනීමට නව ක්‍රම ඉදිරිපත් කරයි. කෙසේ වෙතත්, තුවාල පරිසරයට සහ ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීමට මෙම ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශකවල බලපෑම තුවාල පරිසරයට සහ ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීමට ඇති බලපෑම අහිතකර තුවාල පරිසරයක් නිර්මාණය නොකරන බව හෝ සුව කිරීම ප්‍රමාද නොකරන බව සහතික කිරීම සඳහා වැදගත් වේ. රිදී ඇඳුම් කිහිපයක් සමඟ in vitro රිදී සයිටොටොක්සිසිටි පිළිබඳ කනස්සල්ල වාර්තා වී ඇත10,11. කෙසේ වෙතත්, in vitro සයිටොටොක්සිසිටි තවමත් in vivo විෂ වීම බවට පරිවර්තනය වී නොමැති අතර, Ag1+ ඇඳුම් කිහිපයක් හොඳ ආරක්ෂිත පැතිකඩක් පෙන්නුම් කර ඇත12.
මෙහිදී, අපි in vitro සහ in vivo තුවාල ජෛව පටලයට එරෙහිව නව රිදී සංයෝග අඩංගු කාබොක්සිමීතයිල්සෙලියුලෝස් කණ්නාඩි වල කාර්යක්ෂමතාව විමර්ශනය කළෙමු. ඊට අමතරව, ආසාදනයෙන් ස්වාධීනව ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාර සහ සුව කිරීම කෙරෙහි මෙම කණ්නාඩි වල බලපෑම තක්සේරු කරන ලදී.
භාවිතා කරන ලද සියලුම ඇඳුම් පැළඳුම් වාණිජමය වශයෙන් ලබා ගත හැකි විය. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) යනු මෙම අධ්‍යයනයේ පාලන ඇඳුම ලෙස භාවිතා කරන ලද ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන 100% කාබොක්සිමීතයිල් සෙලියුලෝස් (CMC) ජෙල් තන්තු ඇඳුමකි. ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී CMC රිදී ඇඳුම් තුනක් ඇගයීමට ලක් කරන ලදී, එනම් 3M Kerracel Ag ඇඳුම (3M, Knutsford, UK), එහි 1.7 wt. අඩංගු වේ. ඉහළ සංයුජතා රිදී අයනවල (Ag1+, Ag2+ සහ Ag3+) ඔක්සිජන් සහිත රිදී ලුණු (Ag7NO11). Ag7NO11 වියෝජනය අතරතුර, Ag1+, Ag2+ සහ Ag3+ අයන 1:2:4 අනුපාතයකින් සෑදී ඇත. 1.2% රිදී ක්ලෝරයිඩ් (Ag1+) අඩංගු Aquacel Ag අමතර ඇඳුම (ConvaTec, Deeside, UK) 13 සහ 1.2% රිදී ක්ලෝරයිඩ් (Ag1+), EDTA සහ බෙන්සෙතෝනියම් ක්ලෝරයිඩ් (ConvaTec, Deeside, UK) අඩංගු Aquacel Ag + අමතර ඇඳුම 14.
මෙම අධ්‍යයනයේදී භාවිතා කරන ලද වික්‍රියා වූයේ Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) සහ Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury) ය.
මුලර්-හින්ටන් සුප් හොද්ද තුළ (ඔක්සොයිඩ්, ඇල්ට්‍රින්චෑම්, එක්සත් රාජධානිය) බැක්ටීරියා එක රැයකින් වගා කරන ලදී. පසුව රාත්‍රී සංස්කෘතිය මුලර්-හින්ටන් සුප් හොද්ද තුළ 1:100 තනුක කර 200 µl විෂබීජහරණය කළ 0.2 µm වොට්මන් සයික්ලොපෝර් පටල (වොට්මන් පීඑල්සී, මේඩ්ස්ටන්, එක්සත් රාජධානිය) මත මුලර්-හින්ටන් ඒගාර් තහඩු (සිග්මා-ඇල්ඩ්‍රිච් සමාගම සීමාසහිත, කෙන්ට්, මහා බ්‍රිතාන්‍යය) මත ආලේප කරන ලදී. ) පැය 24 ක් සඳහා 37°C දී යටත් විජිත ජෛව පටල සෑදීම. මෙම යටත් විජිත ජෛව පටල ලඝුගණක හැකිලීම සඳහා පරීක්ෂා කරන ලදී.
ඩ්‍රෙසින් එක වර්ග සෙන්ටිමීටර 3 ක කැබලිවලට කපා විෂබීජහරණය කළ අයනීකරණය කළ ජලයෙන් පෙර තෙතමනය කරන්න. ඒගාර් තහඩුව මත ජනපදයේ ජෛව පටලය මත වෙළුම් පටිය තබන්න. සෑම හෙක්ටයාර 24 ක ජෛව පටලයක්ම ඉවත් කරන ලද අතර, ජෛව පටලය (CFU/ml) තුළ ඇති ශක්‍ය බැක්ටීරියා දිවා-කෝණ උදාසීනකරණ සුප් හොද්ද (මර්ක්-මිලිපෝර්) හි අනුක්‍රමික තනුක කිරීම (10−1 සිට 10−7 දක්වා) මගින් ප්‍රමාණනය කරන ලදී. 37°C දී පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පැය 24 කට පසු, මුලර්-හින්ටන් ඒගාර් තහඩු මත සම්මත තහඩු ගණන් කිරීම් සිදු කරන ලදී. සෑම ප්‍රතිකාරයක් සහ කාල ලක්ෂ්‍යයක්ම ත්‍රිත්ව ලෙස සිදු කරන ලද අතර, එක් එක් තනුක කිරීම සඳහා තහඩු ගණන් කිරීම් නැවත නැවතත් කරන ලදී.
යුරෝපීය සංගමයේ අපනයන ප්‍රමිතීන්ට අනුකූලව, ඝාතනය කිරීමෙන් මිනිත්තු 15ක් ඇතුළත ගැහැණු විශාල සුදු ඌරන්ගෙන් ඌරු මස් බඩේ සම ලබා ගනී. සම රැවුල කපා ඇල්කොහොල් පිසදැමීම් වලින් පිරිසිදු කර, පසුව සම ජීව ශක්තිය නැති කිරීම සඳහා පැය 24ක් -80°C උෂ්ණත්වයකදී ශීත කරන ලදී. දියවීමෙන් පසු, 1 cm2 සම කැබලි PBS, 0.6% සෝඩියම් හයිපොක්ලෝරයිට් සහ 70% එතනෝල් සමඟ විනාඩි 20 බැගින් තුන් වරක් සෝදා ඇත. එපීඩර්මිස් ඉවත් කිරීමට පෙර, ඉතිරි එතනෝල් වඳ PBS හි 3 වතාවක් සේදීමෙන් ඉවත් කරන්න. සම ළිං 6ක තහඩුවක වගා කරන ලද අතර, ඉහළින් 0.45-μm ඝනකම නයිලෝන් පටලයක් (මර්ක්-මිලිපෝර්) සහ 10% ඩල්බෙකෝගේ නවීකරණය කරන ලද ඊගල් සමඟ අතිරේකව මිලි ලීටර් 3 ක භ්‍රෑණ ගව සෙරුමය (සිග්මා) අඩංගු අවශෝෂක පෑඩ් 3ක් (මර්ක්-මිලිපෝර්) අඩංගු වේ. මධ්‍යම (ඩල්බෙකෝගේ නවීකරණය කරන ලද ඊගල් මාධ්‍යය - ඇල්ඩ්‍රිච් ලිමිටඩ්).
ජෛව පටල නිරාවරණ අධ්‍යයනයන් සඳහා විස්තර කර ඇති පරිදි යටත් විජිත ජෛව පටල වගා කරන ලදී. පටලය මත ජෛව පටලය පැය 72ක් වගා කිරීමෙන් පසු, ජෛව පටලය විෂබීජහරණය කළ එන්නත් කිරීමේ ලූපයක් භාවිතයෙන් සම මතුපිටට යොදන ලද අතර පටලය ඉවත් කරන ලදී. ජෛව පටලය ඌරන්ගේ සමට පරිණත වීමට සහ ඇලී සිටීමට ඉඩ සැලසීම සඳහා අමතර පැය 24ක් 37°C දී ඌරන්ගේ ඩර්මිස් මත ඉන්කියුබේට් කරන ලදී. ජෛව පටලය පරිණත වී සවි කළ පසු, විෂබීජහරණය කළ ආසවනය කළ ජලයෙන් පූර්ව තෙතමනය කරන ලද 1.5 cm2 ඇඳුමක් සෘජුවම සම මතුපිටට යොදන ලද අතර පැය 24ක් 37°C දී ඉන්කියුබේට් කරන ලදී. ප්‍රෙස්ටෝබ්ලූ සෛල ශක්‍යතා ප්‍රතික්‍රියාකාරකය (ඉන්විට්‍රජන්, ලයිෆ් ටෙක්නොලොජීස්, පයිස්ලි, එක්සත් රාජධානිය) එක් එක් එක් ප්‍රක්ෂේපණයේ අග්‍ර මතුපිටට ඒකාකාරව යෙදීමෙන් සහ මිනිත්තු 5ක් ඉන්කියුබේට් කිරීමෙන් පැල්ලම් කිරීමෙන් ශක්‍ය බැක්ටීරියා දෘශ්‍යමාන කරන ලදී. ලයිකා MZ8 අන්වීක්ෂයේ ක්ෂණිකව රූප ග්‍රහණය කර ගැනීමට ලයිකා DFC425 ඩිජිටල් කැමරාව භාවිතා කරන්න. රෝස පැහැයෙන් වර්ණ ගැන්වූ ප්‍රදේශ Image Pro මෘදුකාංග අනුවාදය 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)) භාවිතයෙන් ප්‍රමාණනය කරන ලදී. පහත විස්තර කර ඇති පරිදි ස්කෑන් ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය සිදු කරන ලදී.
එක රැයකින් වගා කරන ලද බැක්ටීරියා මුලර්-හින්ටන් සුප් හොද්ද තුළ 1:100 අනුපාතයකින් තනුක කරන ලදී. සංස්කෘතියෙන් 200 μl ක් විෂබීජහරණය කළ 0.2 μm වොට්මන් සයික්ලොපෝර් පටලයට (වොට්මන්, මේඩ්ස්ටන්, එක්සත් රාජධානිය) එකතු කර මුලර්-හින්ටන් ඒගාර් මත ආලේප කරන ලදී. පරිණත ජෛව පටල සෑදීමට ඉඩ දීම සඳහා ජෛව පටල තහඩු පැය 72 ක් 37°C දී පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී.
ජෛව පටල පරිණත වීමෙන් දින 3 කට පසු, වර්ග සෙන්ටිමීටර 3 ක වෙළුම් පටියක් ජෛව පටලය මත කෙලින්ම තබා පැය 24 ක් 37°C උෂ්ණත්වයකදී ඉන්කියුබේට් කරන ලදී. ජෛව පටල මතුපිටින් වෙළුම් පටිය ඉවත් කිරීමෙන් පසු, තත්පර 20 ක් සඳහා PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) මිලි ලීටර් 1 ක් එක් එක් ජෛව පටලයේ මතුපිටට එකතු කරන ලදී. Nikon D2300 ඩිජිටල් කැමරාවක් (Nikon UK Ltd., Kingston, UK) භාවිතයෙන් වර්ණ වෙනස්කම් වාර්තා කිරීමට පෙර මතුපිට වියළන ලදී.
මුලර්-හින්ටන් ඒගාර් මත රාත්‍රී සංස්කෘතීන් සකස් කරන්න, තනි ජනපද මුලර්-හින්ටන් සුප් හොද්දට මිලි ලීටර් 10 ක් මාරු කර 37°C (100 rpm) දී ෂේකර් එකක් මත පුර්ව ලියාපදිංචි කරන්න. එක රැයකින් පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පසු, සංස්කෘතිය මුලර්-හින්ටන් සුප් හොද්ද තුළ 1:100 තනුක කරන ලද අතර 300 µl මුලර්-හින්ටන් ඒගාර් මත 0.2 µm චක්‍රලේඛ වට්මන් සයික්ලොපෝර් පටලය (වට්මන් ඉන්ටර්නැෂනල්, මේඩ්ස්ටන්, එක්සත් රාජධානිය) මත දක්නට ලැබුණු අතර පැය 72 ක් ඇතුළත 37°C දී පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී. පහත විස්තර කර ඇති පරිදි පරිණත ජෛව පටලය තුවාලයට යොදන ලදී.
සතුන් සමඟ කරන ලද සියලුම කටයුතු මැන්චෙස්ටර් විශ්ව විද්‍යාලයේ සත්ව සුභසාධනය සහ සදාචාරාත්මක සමාලෝචන කාර්යාලය (P8721BD27) විසින් අනුමත කරන ලද ව්‍යාපෘති බලපත්‍රයක් යටතේ සහ 2012 සංශෝධිත ASPA යටතේ ස්වදේශ කටයුතු කාර්යාලය විසින් ප්‍රකාශයට පත් කරන ලද මාර්ගෝපදේශයන්ට අනුකූලව සිදු කරන ලදී. සියලුම කතුවරුන් පැමිණීමේ මාර්ගෝපදේශවලට අනුකූල විය. සති අටක් වයසැති C57BL/6j මීයන් (Envigo, Oxon, UK) සියලුම in vivo අධ්‍යයනයන් සඳහා භාවිතා කරන ලදී. මීයන් අයිසොෆ්ලුරේන් (පිරමල් ක්‍රිටිකල් කෙයාර් ලිමිටඩ්, වෙස්ට් ඩ්‍රේටන්, UK) සමඟ නිර්වින්දනය කරන ලද අතර ඒවායේ පෘෂ්ඨීය මතුපිට රැවුල කපා පිරිසිදු කරන ලදී. ඉන්පසු සෑම මීයෙකුටම ස්ටීෆල් බයොප්සි පන්ච් (Schuco International, Hertfordshire, UK) භාවිතයෙන් 2 × 6 mm කෘමිනාශක තුවාලයක් ලබා දෙන ලදී. ජෛව පටල-ආසාදිත තුවාල සඳහා, ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි පටලය මත වගා කරන ලද පැය 72 ක යටත් විජිත ජෛව පටලය තුවාල වූ වහාම වඳ එන්නත් කිරීමේ ලූපයක් භාවිතයෙන් තුවාලයේ චර්ම ස්ථරයට යොදන්න සහ පටලය ඉවතලන්න. තුවාලයේ තෙතමනය සහිත පරිසරයක් පවත්වා ගැනීම සඳහා වර්ග සෙන්ටිමීටරයක වෙළුම් පටියක් විෂබීජහරණය කළ ජලයෙන් පූර්ව තෙතමනය කර ඇත. සෑම තුවාලයකටම කෙලින්ම ඇඳුම් ආලේප කර 3M ටෙගාඩර්ම් පටලයකින් (3M, බ්‍රැක්නෙල්, UK) සහ අතිරේක ඇලවීමක් ලබා දීම සඳහා දාර වටා මැස්ටිසෝල් දියර මැලියම් (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) ආලේප කරන ලදී. බුප්‍රෙනෝෆින් (Animalcare, York, UK) වේදනා නාශකයක් ලෙස 0.1 mg/kg සාන්ද්‍රණයකින් ලබා දෙන ලදී. උපලේඛන 1 ක්‍රමය භාවිතයෙන් තුවාල වීමෙන් දින තුනකට පසු මීයන් කපා ඉවත් කර, අවශ්‍ය පරිදි තුවාල ප්‍රදේශය ඉවත් කර, අඩකින් කපා, ගබඩා කරන්න.
නිෂ්පාදකයාගේ ප්‍රොටෝකෝලයට අනුව හෙමාටොක්සිලින් (තර්මෝෆිෂර් සයන්ටිෆික්) සහ ඉයෝසින් (තර්මෝෆිෂර් සයන්ටිෆික්) පැල්ලම් කිරීම සිදු කරන ලදී. තුවාල ප්‍රදේශය සහ නැවත එපිටිලියල්කරණය Image Pro මෘදුකාංග අනුවාදය 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD) භාවිතයෙන් ප්‍රමාණනය කරන ලදී.
පටක කොටස් සයිලීන් (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK) වලින් ඉවත් කර, 100-50% ශ්‍රේණිගත එතනෝල් සමඟ නැවත සජලනය කර, කෙටියෙන් අයනීකරණය කළ ජලයේ (ThermoFisher Scientific) ගිල්වන ලදී. නිෂ්පාදකයාගේ ප්‍රොටෝකෝලයට අනුව VectaStain Elite ABC PK-6104 කට්ටලය (Vector Laboratories, Burlingame, CA) භාවිතයෙන් ප්‍රතිශක්තිකරණ රසායන විද්‍යාව සිදු කරන ලදී. නියුට්‍රොෆිල්ස් NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) සහ macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) සඳහා ප්‍රාථමික ප්‍රතිදේහ අවහිර කිරීමේ ද්‍රාවණයක 1:100 තනුක කර කැපූ මතුපිටට එකතු කරන ලදී, ඉන්පසු ප්‍රති-, VectaStain ABC සහ Vector Nova Red Peroxidase (HRP) උපස්ථර කට්ටලය (Vector Laboratories, Burlingame, CA) ප්‍රති-පැල්ලම් කරන ලද ප්‍රතිදේහ 2 ක් සහ hematoxylin සමඟ ප්‍රති-පැල්ලම් කරන ලදී. ඔලිම්පස් BX43 අන්වීක්ෂයක් සහ ඔලිම්පස් DP73 ඩිජිටල් කැමරාවක් (ඔලිම්පස්, සවුත්එන්ඩ්-ඔන්-සී, එක්සත් රාජධානිය) භාවිතයෙන් රූප ලබා ගන්නා ලදී.
සම සාම්පල 2.5% ග්ලූටරල්ඩිහයිඩ් සහ 4% ෆෝමල්ඩිහයිඩ් 0.1 M HEPES (pH 7.4) හි පැය 24ක් 4°C දී සවි කරන ලදී. සාම්පල ශ්‍රේණිගත එතනෝල් භාවිතයෙන් විජලනය කර CO2 හි Quorum K850 තීරණාත්මක ලක්ෂ්‍ය වියළුමක් (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) භාවිතයෙන් වියළන ලද අතර Quorum SC7620 කුඩා ස්පුටරර්/ග්ලෝ විසර්ජන පද්ධතියක් භාවිතයෙන් රන්-පැලේඩියම් මිශ්‍ර ලෝහයෙන් ආලේප කරන ලද ස්පුටර්. තුවාලයේ මධ්‍ය ලක්ෂ්‍යය දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා FEI Quanta 250 ස්කෑනිං ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂයක් (ThermoFisher Scientific) භාවිතයෙන් නිදර්ශක රූපගත කරන ලදී.
ඉවත් කරන ලද මීයාගේ තුවාල මතුපිටට ටෝටෝ-1 අයඩයිඩ් (2 μM) යොදන ලද අතර 37 °C (ThermoFisher Scientific) හි මිනිත්තු 5 ක් පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලද අතර 37 °C (ThermoFisher Scientific) හි සයිටෝ-60 (10 μM) සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලදී. ලයිකා TCS SP8 භාවිතයෙන් මිනිත්තු 15 ක Z-ස්ටැක් රූප නිර්මාණය කරන ලදී.
ජීව විද්‍යාත්මක සහ තාක්ෂණික අනුරූ දත්ත ග්‍රැෆ්පෑඩ් ප්‍රිස්ම් V9 මෘදුකාංගය (ග්‍රැෆ්පෑඩ් මෘදුකාංගය, ලා ජොල්ලා, කැලිෆෝනියා) භාවිතයෙන් වගුගත කර විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ඩනට්ගේ පශ්චාත් කාලීන පරීක්ෂණය භාවිතයෙන් බහු සැසඳීම් සමඟ විචලතාව පිළිබඳ ඒකපාර්ශ්වික විශ්ලේෂණය එක් එක් ප්‍රතිකාරය සහ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ඇඳුම අතර වෙනස්කම් පරීක්ෂා කිරීම සඳහා භාවිතා කරන ලදී. p අගය <0.05 සැලකිය යුතු ලෙස සැලකේ.
රිදී ජෙල් තන්තුමය කණ්නාඩි වල සඵලතාවය මුලින්ම තක්සේරු කරන ලද්දේ ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් සහ සූඩොමොනාස් ඒරුගිනෝසා ඉන් විට්‍රෝ හි ජෛව පටල ජනපදවලට එරෙහිව ය. රිදී කණ්නාඩි වල විවිධ රිදී සූත්‍ර අඩංගු වේ: සාම්ප්‍රදායික රිදී කණ්නාඩි Ag1+ අයන නිපදවයි; EDTA/BC එකතු කිරීමෙන් පසු Ag1+ අයන නිපදවිය හැකි රිදී කණ්නාඩි, ජෛව පටල අනුකෘතිය විනාශ කළ හැකි අතර රිදීවල ප්‍රතිබැක්ටීරීය බලපෑම යටතේ බැක්ටීරියා රිදී වලට නිරාවරණය කළ හැකිය. අයන15 සහ Ag1+, Ag2+ සහ Ag3+ අයන නිපදවන ඔක්සිජන් සහිත Ag ලවණ අඩංගු කණ්නාඩි. එහි කාර්යක්ෂමතාව ජෙල් කරන ලද තන්තු වලින් සාදන ලද ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන කණ්නාඩියක් සමඟ සංසන්දනය කරන ලදී. ජෛව පටලය තුළ ඉතිරිව ඇති ශක්‍ය බැක්ටීරියා සෑම පැය 24 කට වරක් දින 8 ක් සඳහා තක්සේරු කරන ලදී (රූපය 1). 5 වන දින, ජෛව පටලය 3.85 × 105S සමඟ නැවත එන්නත් කරන ලදී. ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් හෝ 1.22×105P. aeruginosa ජෛව පටල ප්‍රතිසාධනය තක්සේරු කිරීම සඳහා. ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ඇඳුම් පැළඳුම් හා සසඳන විට, Ag1+ ඇඳුම් පැළඳුම් දින 5 ක් පුරා ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් සහ සූඩොමොනාස් ඒරුගිනෝසා ජෛව පටලවල බැක්ටීරියා ශක්‍යතාව කෙරෙහි අවම බලපෑමක් ඇති කළේය. ඊට වෙනස්ව, ඔක්සිජන් සහිත Ag සහ Ag1+ + EDTA/BC ලවණ අඩංගු ඇඳුම් පැළඳුම් දින 5 ක් ඇතුළත ජෛව පටලය තුළ ඇති බැක්ටීරියා විනාශ කිරීමට ඵලදායී විය. 5 වන දින ප්ලවාංග බැක්ටීරියා සමඟ නැවත නැවත එන්නත් කිරීමෙන් පසුව, ජෛව පටලයේ ප්‍රතිසාධනයක් නිරීක්ෂණය නොවීය (රූපය 1).
රිදී ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් සහ සූඩොමොනාස් ඒරුගිනෝසා ජෛව පටලවල ශක්‍ය බැක්ටීරියා ප්‍රමාණනය කිරීම. ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් සහ සූඩොමොනාස් ඒරුගිනෝසා වල ජෛව පටල ජනපද රිදී ආලේපන හෝ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද අතර, ඉතිරිව ඇති ශක්‍ය බැක්ටීරියා ගණන සෑම පැය 24 කට වරක් තීරණය කරන ලදී. දින 5 කට පසු, ජෛව පටලය 3.85×105S සමඟ නැවත එන්නත් කරන ලදී. ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් හෝ 1.22×105P. ජෛව පටල ප්‍රතිසාධනය තක්සේරු කිරීම සඳහා බැක්ටීරියා ප්ලැන්ක්ටන් සූඩොමොනාස් ඒරුගිනෝසා වල ජනපද තනි තනිව සාදන ලදී. ප්‍රස්ථාර මධ්‍යන්‍ය +/- සම්මත දෝෂය පෙන්වයි.
ජෛව පටල ශක්‍යතාවයට රිදී ආලේපනවල බලපෑම දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා, ඌරු සම මත වගා කරන ලද පරිණත ජෛව පටල සඳහා ආලේපන යොදන ලදී. පැය 24 කට පසු, ඇඳුම ඉවත් කර ජෛව පටලය නිල් ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඩයි එකකින් පැල්ලම් කරනු ලබන අතර, එය ජීවමාන බැක්ටීරියා මගින් රෝස පැහැයට පරිවෘත්තීය වේ. පාලන ඇඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද ජෛව පටල රෝස පැහැයෙන් යුක්ත වූ අතර, ජෛව පටලය තුළ ශක්‍ය බැක්ටීරියා පවතින බව පෙන්නුම් කරයි (රූපය 2A). ඊට වෙනස්ව, Ag ඔක්සිසෝල් ආලේපනය සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද ජෛව පටලය ප්‍රධාන වශයෙන් නිල් පැහැයෙන් යුක්ත වූ අතර, ඌරන්ගේ සමේ මතුපිට ඉතිරි බැක්ටීරියා ශක්‍ය නොවන බැක්ටීරියා බව පෙන්නුම් කරයි (රූපය 2B). Ag1+ අඩංගු ඇඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද ජෛව පටලවල මිශ්‍ර නිල් සහ රෝස පැහැයක් නිරීක්ෂණය කරන ලද අතර, ජෛව පටලය තුළ ශක්‍ය සහ ශක්‍ය නොවන බැක්ටීරියා පවතින බව පෙන්නුම් කරයි (රූපය 2C), නමුත් Ag1+ අඩංගු EDTA/BC ඇඳුම් ප්‍රධාන වශයෙන් නිල් පැහැයෙන් යුක්ත වූ අතර සමහර රෝස පැහැති ලප ඇත. රිදී ඇඳුමෙන් බලපෑමට ලක් නොවූ ප්‍රදේශ දක්වයි (රූපය 2D). ක්‍රියාකාරී (රෝස) සහ අක්‍රිය (නිල්) ප්‍රදේශ ප්‍රමාණනය කිරීමෙන් පෙන්නුම් කළේ පාලන පැල්ලම 75% ක් ක්‍රියාකාරී බවයි (රූපය 2E). Ag1+ + EDTA/BC කණ්නාඩි ඔක්සිජන් සහිත Ag ලුණු කණ්නාඩි වලට සමානව සිදු කරන ලද අතර, පැවැත්මේ අනුපාතය පිළිවෙලින් 13% සහ 14% කි. Ag1+ කණ්නාඩි මගින් බැක්ටීරියා ශක්‍යතාව 21% කින් අඩු කරන ලදී. පසුව මෙම ජෛව පටල ස්කෑනිං ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය (SEM) භාවිතයෙන් නිරීක්ෂණය කරන ලදී. පාලන කණ්නාඩි සහ Ag1+ කණ්නාඩි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු, ඌරු සම ආවරණය කරමින් Pseudomonas aeruginosa තට්ටුවක් නිරීක්ෂණය කරන ලදී (රූපය 2F,H), නමුත් Ag1+ කණ්නාඩි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු, බැක්ටීරියා සෛල කිහිපයක් හමු වූ අතර යටින් බැක්ටීරියා සෛල කිහිපයක් හමු විය. කොලජන් තන්තු ඌරු සමේ පටක ව්‍යුහය ලෙස සැලකිය හැකිය (රූපය 2G). Ag1+ + EDTA/BC කණ්නාඩි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු, බැක්ටීරියා සමරු ඵලක සහ යටින් පවතින කොලජන් තන්තු කණ්නාඩි දෘශ්‍යමාන විය (රූපය 2I).
රිදී ආලේපන ප්‍රතිකාරයෙන් පසු Pseudomonas aeruginosa ජෛව පටල දෘශ්‍යකරණය කිරීම. (A–D) ඌරු සම මත වගා කරන ලද Pseudomonas aeruginosa ජෛව පටලවල බැක්ටීරියා ශක්‍යතාව, රිදී ආලේපන හෝ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පැය 24 කට පසු PrestoBlue ජීව්‍යතා සායම් භාවිතයෙන් දෘශ්‍යකරණය කරන ලදී. සජීවී බැක්ටීරියා රෝස පැහැයෙන් යුක්ත වන අතර, ශක්‍ය නොවන බැක්ටීරියා සහ ඌරු සම නිල් පැහැයෙන් යුක්ත වේ. (E) ස්කෑනිං ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය Image Pro අනුවාදය 10 (FI) භාවිතයෙන් ඌරු සම (රෝස ලප) මත වගා කරන ලද Pseudomonas aeruginosa ජෛව පටල ප්‍රමාණනය කිරීම සහ පැය 24 ක් සඳහා රිදී ආලේපනයක් හෝ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපනයකින් ප්‍රතිකාර කරන ලදී. SEM පරිමාණ තීරුව = 5 µm. (J–M) යටත් විජිත ජෛව පටල පෙරහන් මත වර්ධනය වූ අතර රිදී ආලේපන සමඟ පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පැය 24 කට පසු PrestoBlue ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඩයි සමඟ පැල්ලම් කරන ලදී.
ඇඳුම් පැළඳුම් සහ ජෛව පටල අතර සමීප සම්බන්ධතාවය ඇඳුම් පැළඳුම්වල කාර්යක්ෂමතාවයට බලපාන්නේද යන්න තීරණය කිරීම සඳහා, පැතලි මතුපිටක් මත තබා ඇති යටත් විජිත ජෛව පටල පැය 24 ක් ඇඳුම් පැළඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කර පසුව ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඩයි වර්ග වලින් පැල්ලම් කරන ලදී. ප්‍රතිකාර නොකළ ජෛව පටලය තද රෝස පැහැයෙන් යුක්ත විය (රූපය 2J). ඔක්සිජන් සහිත Ag ලවණ අඩංගු ඇඳුම් පැළඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද ජෛව පටලවලට වෙනස්ව, Ag1+ හෝ Ag1+ + EDTA/BC අඩංගු ඇඳුම් පැළඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද ජෛව පටල රෝස පැහැති පැල්ලම් පටි පෙන්නුම් කළේය (රූපය 2L,M). මෙම රෝස පැහැයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ ශක්‍ය බැක්ටීරියා පවතින බව සහ ඇඳුම තුළ ඇති මැහුම් ප්‍රදේශය සමඟ සම්බන්ධ වේ. මෙම මැහුම් කරන ලද ප්‍රදේශ ජෛව පටලය තුළ බැක්ටීරියා වලට ජීවත් වීමට ඉඩ සලසන මළ අවකාශයන් නිර්මාණය කරයි.
ජීව විද්‍යාත්මකව රිදී ආලේපනවල කාර්යක්ෂමතාව තක්සේරු කිරීම සඳහා, පරිණත S. aureus සහ P. aeruginosa ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ මීයන්ගේ සම්පූර්ණ ඝනකම කපා ඉවත් කරන ලද තුවාල වලට ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපන හෝ රිදී ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලදී. දින 3 ක ප්‍රතිකාරයකින් පසු, සාර්ව රූප විශ්ලේෂණයෙන් ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපන සහ අනෙකුත් රිදී ආලේපන හා සසඳන විට ඔක්සිජන් සහිත ලුණු ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කරන විට කුඩා තුවාල ප්‍රමාණයන් පෙන්නුම් කරන ලදී (රූපය 3A-H). මෙම නිරීක්ෂණ තහවුරු කිරීම සඳහා, තුවාල අස්වනු නෙළන ලද අතර රූප ප්‍රෝ මෘදුකාංග අනුවාදය 10 (රූපය 3I-L) භාවිතයෙන් හෙමාටොක්සිලින් සහ ඉයෝසින්-පැල්ලම් කළ පටක කොටස් මත තුවාල ප්‍රදේශය සහ නැවත එපිටිලියලීකරණය ප්‍රමාණනය කරන ලදී.
තුවාල මතුපිටට රිදී ආලේපනවල බලපෑම සහ ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාල නැවත එපිටිලියල්කරණය කිරීම. (A–H) ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ඇඳුමක්, ඔක්සිජන් සහිත Ag ලුණු ඇඳුමක්, Ag1+ ඇඳුමක් සහ Ag1+ ඇඳුමක් සමඟ දින තුනක ප්‍රතිකාරයකින් පසු Pseudomonas aeruginosa (A–D) සහ Staphylococcus aureus (E–H) ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ කුඩා සෛල. නියෝජිත මැක්‍රොස්කොපික් රූප. Ag1+ + EDTA/BC ඇඳුමක් සහිත මීයන්ගේ තුවාල. (IL) නියෝජිත Pseudomonas aeruginosa ආසාදනය, hematoxylin සහ eosin වලින් පැල්ලම් කරන ලද හිස්ටොලොජිකල් කොටස්, තුවාල ප්‍රදේශය සහ එපිටිලියල් පුනර්ජනනය ප්‍රමාණනය කිරීමට භාවිතා කරයි. තුවාල ප්‍රදේශය (M, O) ප්‍රමාණනය කිරීම සහ Pseudomonas aeruginosa (M, N) සහ Staphylococcus aureus (O, P) ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාලවල ප්‍රතිශතය (N, P) (ප්‍රතිකාර කාණ්ඩය අනුව n = 12). ප්‍රස්ථාර මධ්‍යන්‍ය +/- සම්මත දෝෂය පෙන්වයි. * යන්නෙන් p = < 0.05 ** යන්නෙන් p = < 0.01 යන්නෙන් අදහස් වේ; මැක්‍රොස්කොපික් පරිමාණය = 2.5 මි.මී., හිස්ටෝල් පරිමාණය = 500 µm.
Pseudomonas aeruginosa ජෛව පටලයෙන් ආසාදනය වූ තුවාලවල තුවාල ප්‍රදේශය ප්‍රමාණනය කිරීමෙන් (රූපය 3M) පෙන්නුම් කළේ Ag ඔක්සිසල්ට් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද තුවාලවල සාමාන්‍ය තුවාල ප්‍රමාණය 2.5 mm2 ක් වූ අතර, ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ඇඳුමේ සාමාන්‍ය තුවාල ප්‍රමාණය 3.1 mm2 ක් වූ අතර එය සත්‍ය නොවේ. සංඛ්‍යානමය වැදගත්කමක් ලබා ගත්තේය (රූපය 3M). p = 0.423). Ag1+ හෝ Ag1+ + EDTA/BC සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද තුවාලවල තුවාල ප්‍රදේශයේ අඩුවීමක් දක්නට නොලැබුණි (පිළිවෙලින් 3.1 mm2 සහ 3.6 mm2). ඔක්සිජන් සහිත Ag ලුණු ඇඳුම සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීම ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ඇඳුමට (පිළිවෙලින් 34% සහ 15%; p = 0.029) සහ Ag1+ හෝ Ag1+ + EDTA/BC (10% සහ 11%) (රූපය 3N) . , පිළිවෙලින්).
තුවාල ප්‍රදේශයේ සහ එපිටිලියල් පුනර්ජනනයේ සමාන ප්‍රවණතා S. aureus ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාල වල දක්නට ලැබුණි (රූපය 3O). ඔක්සිජන් සහිත රිදී ලවණ අඩංගු ඇඳුම් පැළඳුම් මගින් පාලන නොවන ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී ඇඳුම (2.6 mm2) හා සසඳන විට තුවාල ප්‍රදේශය (2.0 mm2) 23% කින් අඩු කරන ලදී, නමුත් මෙම අඩුවීම සැලකිය යුතු නොවීය (p = 0.304) (රූපය 3O). ඊට අමතරව, Ag1+ ප්‍රතිකාර කණ්ඩායමේ තුවාල ප්‍රදේශය තරමක් අඩු විය (2.4 mm2), Ag1+ + EDTA/BC ඇඳුමෙන් ප්‍රතිකාර කළ තුවාලය තුවාල ප්‍රදේශය (2.9 mm2) අඩු කළේ නැත. Ag හි ඔක්සිජන් ලවණ ද S. aureus ජෛව පටලයෙන් (31%) ආසාදනය වූ තුවාල නැවත-එපිටිලියල්කරණය ප්‍රවර්ධනය කළේය, ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ඇඳුමෙන් ප්‍රතිකාර කළ ඒවාට වඩා විශාල ප්‍රමාණයකට (12%, p = 0.003) (රූපය 3P). Ag1+ ඇඳුම (16%, p = 0.903) සහ Ag+1 + EDTA/BC ඇඳුම (14%, p = 0.965) පාලනයට සමාන අපිච්ඡද පුනර්ජනන මට්ටම් පෙන්නුම් කළේය.
ජෛව පටල අනුකෘතියට රිදී ආලේපනවල බලපෑම දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා, ටෝටෝ 1 සහ සයිටෝ 60 අයඩයිඩ් පැල්ලම් කිරීම සිදු කරන ලදී (රූපය 4). ටෝටෝ 1 අයඩයිඩ් යනු සෛල-අප්‍රවාහ්‍ය ඩයි වර්ගයක් වන අතර එය ජෛව පටලවල EPS හි බහුලව ඇති බාහිර සෛලීය න්‍යෂ්ටික අම්ල නිවැරදිව දෘශ්‍යමාන කිරීමට භාවිතා කළ හැකිය. සයිටෝ 60 යනු ප්‍රති-පැල්ලමක් ලෙස භාවිතා කරන සෛල පාරගම්ය ඩයි වර්ගයකි16. සූඩෝමොනාස් ඒරුගිනෝසා (රූපය 4A-D) සහ ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් (රූපය 4I-L) ජෛව පටල සමඟ එන්නත් කරන ලද තුවාල වල ටෝටෝ 1 සහ සයිටෝ 60 අයඩයිඩ් නිරීක්ෂණවලින් පෙනී ගියේ දින 3 ක ඇඳුම් ප්‍රතිකාරයකින් පසු ජෛව පටලයේ EPS සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වූ බවයි. ඔක්සිජන් සහිත ලවණ Ag සහ Ag1+ + EDTA/BC අඩංගු වේ. අතිරේක ප්‍රති-ජෛව පටල සංරචක නොමැතිව Ag1+ ආලේපන Pseudomonas aeruginosa සමඟ එන්නත් කරන ලද තුවාල වල සෛල-නිදහස් DNA සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළ නමුත් ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් සමඟ එන්නත් කරන ලද තුවාල වලදී අඩු ඵලදායී විය.
පාලන හෝ රිදී කණ්නාඩි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් දින 3 කට පසු තුවාල ජෛව පටලයේ සජීවී රූපකරණය. බාහිර සෛලීය ජෛව පටල බහු අවයවක සංරචකයක් වන බාහිර සෛලීය න්‍යෂ්ටික අම්ල දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා ටෝටෝ 1 (කොළ) සමඟ පැල්ලම් කරන ලද සූඩෝමොනාස් ඒරුගිනෝසා (A–D) සහ ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් (I–L) වල කොන්ෆෝකල් රූප. අන්තර් සෛලීය න්‍යෂ්ටික අම්ල පැල්ලම් කිරීමට, සයිටෝ 60 (රතු) භාවිතා කරන්න. අම්ල. පී. පාලන සහ රිදී කණ්නාඩි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් දින 3 කට පසු සූඩෝමොනාස් ඒරුගිනෝසා (E–H) සහ ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් (M–P) ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාලවල ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය පරිලෝකනය කිරීම. SEM පරිමාණ තීරුව = 5 µm. කොන්ෆෝකල් රූපකරණ පරිමාණ තීරුව = 50 µm.
ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂයක් පරිලෝකනය කිරීමෙන් පෙන්නුම් කළේ, සියලුම රිදී ඇඳුම් සමඟ දින 3 ක ප්‍රතිකාරයකින් පසු, Pseudomonas aeruginosa (රූපය 4E-H) සහ Staphylococcus aureus (රූපය 4M-P) ජෛව පටල ජනපද එන්නත් කරන ලද මීයන්ගේ තුවාලවල බැක්ටීරියා සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වී ඇති බවයි.
ජෛව පටල-ආසාදිත මීයන් තුළ තුවාලයේ දැවිල්ලට රිදී ආලේපනවල බලපෑම තක්සේරු කිරීම සඳහා, දින 3 ක් සඳහා පාලන හෝ රිදී ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද ජෛව පටල-ආසාදිත තුවාලවල කොටස් නියුට්‍රොෆිල් සහ මැක්‍රෝෆේජ් සඳහා විශේෂිත ප්‍රතිදේහ භාවිතයෙන් ප්‍රතිශක්තිකරණ-රසායනිකව පැල්ලම් කරන ලදී. අභ්‍යන්තරව නියුට්‍රොෆිල් සහ මැක්‍රෝෆේජ් ප්‍රමාණාත්මකව නිර්ණය කිරීම. කැටිති පටක. රූපය 5). සියලුම රිදී ආලේපන, ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් දින තුනක කාලයකට පසු ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපන සමඟ සසඳන විට, සූඩෝමොනාස් ඒරුගිනෝසා ආසාදනය වූ තුවාලවල නියුට්‍රොෆිල් සහ මැක්‍රෝෆේජ් ගණන අඩු කළේය. කෙසේ වෙතත්, ඔක්සිජන් සහිත රිදී ලුණු ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පරීක්ෂා කරන ලද අනෙකුත් රිදී ආලේපන හා සසඳන විට නියුට්‍රොෆිල් (p = <0.0001) සහ මැක්‍රෝෆේජ් (p = <0.0001) හි වැඩි අඩුවීමක් ඇති විය (රූපය 5I,J). Ag1+ + EDTA/BC තුවාලයේ ජෛව පටලයට වැඩි බලපෑමක් ඇති කළද, එය Ag1+ ආලේපනයට වඩා අඩු ප්‍රමාණයකට නියුට්‍රොෆිල් සහ මැක්‍රෝෆේජ් මට්ටම් අඩු කළේය. S. aureus ජෛව පටලයෙන් ආසාදනය වූ මධ්‍යස්ථ තුවාල, Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) සහ Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) ඔක්සිසෝල් සමඟ ඇඳුම් ඇඳීමෙන් පසුව ද නිරීක්ෂණය විය. නියුට්‍රොපීනියා සඳහා සමාන ප්‍රවණතා දක්නට ලැබේ. බැන්ඩේජ් (රූපය 5K). කෙසේ වෙතත්, ඔක්සිජන් සහිත Ag ලුණු ඇඳුම පමණක් S. aureus ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාල වල පාලනයට සාපේක්ෂව කැටිති පටක වල මැක්‍රෝෆේජ් ගණනෙහි සැලකිය යුතු අඩුවීමක් පෙන්නුම් කළේය (රූපය 5L).
ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී පාලනයක් හෝ රිදී ආලේපන සමඟ දින 3 ක ප්‍රතිකාරයකින් පසු, සූඩෝමොනාස් ඒරුගිනෝසා සහ ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාල වල නියුට්‍රොෆිල්ස් සහ මැක්‍රෝෆේජ් ප්‍රමාණනය කරන ලදී. නියුට්‍රොෆිල්ස් හෝ මැක්‍රෝෆේජ් සඳහා විශේෂිත ප්‍රතිදේහ වලින් පැල්ලම් කරන ලද පටක කොටස් වල නියුට්‍රොෆිල්ස් (AD) සහ මැක්‍රෝෆේජ් (EH) ප්‍රමාණනය කරන ලදී. සූඩෝමොනාස් ඒරුගිනෝසා (I සහ J) සහ ස්ටැෆිලොකොකස් ඕරියස් (K සහ L) ජෛව පටල වලින් ආසාදනය වූ තුවාල වල නියුට්‍රොෆිල්ස් (I සහ K) සහ මැක්‍රෝෆේජ් (J සහ L) ප්‍රමාණනය කිරීම. කණ්ඩායමකට N = 12. ප්‍රස්ථාර සාමාන්‍ය +/- සම්මත දෝෂය පෙන්වයි, ප්‍රතිබැක්ටීරීය නොවන පාලන ආලේපනයට සාපේක්ෂව වැදගත්කම අගයන්, * අදහස් p = < 0.05, ** අදහස් p = < 0.01; *** අදහස් p = < 0.001; p = <0.0001 දක්වයි).
ඉන්පසු අපි ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීම සඳහා රිදී ආලේපනවල බලපෑම තක්සේරු කළෙමු. ආසාදිත නොවන ඉවත් කිරීමේ තුවාල වලට දින 3 ක් සඳහා ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන ආලේපනයක් හෝ රිදී ආලේපනයක් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලදී (රූපය 6). පරීක්ෂා කරන ලද රිදී ආලේපන අතර, ඔක්සිජන් සහිත ලුණු ආලේපනයෙන් ප්‍රතිකාර කරන ලද තුවාල පමණක් මැක්‍රොස්කොපික් රූපවල පාලනයෙන් ප්‍රතිකාර කරන ලද තුවාල වලට වඩා කුඩා බව පෙනෙන්නට තිබුණි (රූපය 6A-D). හිස්ටොලොජිකල් විශ්ලේෂණය භාවිතයෙන් තුවාල ප්‍රදේශය ප්‍රමාණනය කිරීමෙන් පෙන්නුම් කළේ Ag ඔක්සිසෝල් ආලේපනයෙන් ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු සාමාන්‍ය තුවාල ප්‍රදේශය පාලන කණ්ඩායම සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද තුවාල සඳහා 2.96 mm2 ට සාපේක්ෂව 2.35 mm2 බවයි, නමුත් මෙම වෙනස සංඛ්‍යානමය වැදගත්කමට ළඟා නොවීය (p = 0.488) (රූපය 6I). ඊට වෙනස්ව, පාලන කණ්ඩායමට සාපේක්ෂව Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) හෝ Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු තුවාල ප්‍රදේශයේ අඩුවීමක් නිරීක්ෂණය නොවීය. පාලන කණ්ඩායමට සාපේක්ෂව Ag ඔක්සිසෝල් ඇඳුම සමඟ අපිච්ඡද පුනර්ජනනය වැඩි වීමක් නිරීක්ෂණය විය (පිළිවෙලින් 30% vs. 22%), මෙය වැදගත්කමට ළඟා නොවූවත් (p = 0.067), මෙය බෙහෙවින් වැදගත් වන අතර පෙර ප්‍රතිඵල සනාථ කරයි. ඔක්සිසෝල් සහිත ඇඳුමක් නැවත අපිච්ඡදකරණය ප්‍රවර්ධනය කරයි. -ආසාදිත නොවන තුවාල එපිටිලිකරණය17. ඊට වෙනස්ව, Ag1+ හෝ Ag1+ + EDTA/BC ඇඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් කිසිදු බලපෑමක් සිදු නොවීය හෝ පාලනයට සාපේක්ෂව නැවත අපිච්ඡදකරණය අඩුවීමක් පෙන්නුම් කළේය.
ආසාදිත නොවන මීයන් තුළ සම්පූර්ණ වෙන් කිරීමත් සමඟ රිදී තුවාල වෙළුම් පටියක් තුවාල සුව කිරීම සඳහා බලපෑම. (AD) ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන පාලන වෙළුම් පටියක් සහ රිදී වෙළුම් පටියක් සමඟ දින තුනක ප්‍රතිකාරයකින් පසු තුවාලවල නියෝජිත මැක්‍රොස්කොපික් රූප. (EH) හෙමැටොක්සිලින් සහ ඉයෝසින් වලින් පැල්ලම් කරන ලද නියෝජිත තුවාල කොටස්. තුවාල ප්‍රදේශය (I) ප්‍රමාණනය කිරීම සහ නැවත එපිටිලියලීකරණයේ (J) ප්‍රතිශතය රූප විශ්ලේෂණ මෘදුකාංග භාවිතයෙන් තුවාලයේ මැද ලක්ෂ්‍යයේ හිස්ටොලොජිකල් අංශවලින් ගණනය කරන ලදී (ප්‍රතිකාර කණ්ඩායමකට n = 11–12). ප්‍රස්ථාර මධ්‍යන්‍ය +/- සම්මත දෝෂය පෙන්වයි. * මධ්‍යන්‍ය p = <0.05 යන්නෙන් අදහස් වේ.
රිදී තුවාල සුව කිරීමේදී ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී ප්‍රතිකාරයක් ලෙස භාවිතා කිරීමේ දිගු ඉතිහාසයක් ඇත, නමුත් බොහෝ වෙනස් සූත්‍රගත කිරීම් සහ බෙදා හැරීමේ ක්‍රම නිසා ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී කාර්යක්ෂමතාවයේ වෙනස්කම් ඇති විය හැක 18. එපමණක් නොව, නිශ්චිත රිදී බෙදා හැරීමේ පද්ධතිවල ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී පටල ගුණාංග සම්පූර්ණයෙන් වටහාගෙන නොමැත. ප්ලාන්ක්ටොනික් බැක්ටීරියා වලට එරෙහිව ධාරක ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරය සාපේක්ෂව ඵලදායී වුවද, එය සාමාන්‍යයෙන් ජෛව පටල වලට එරෙහිව අඩු ඵලදායී වේ19. ප්ලාන්ක්ටොනික් බැක්ටීරියා මැක්‍රෝෆේජ් මගින් පහසුවෙන් ෆාගෝසයිටෝස් කරනු ලැබේ, නමුත් ජෛව පටල තුළ, සමුච්චිත සෛල ප්‍රතිශක්තිකරණ සෛල ඇපොප්ටෝසිස් වලට භාජනය විය හැකි අතර ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරය වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා ප්‍රෝගිනි අවුලුවන සාධක මුදා හැරිය හැකි ප්‍රමාණයට ධාරක ප්‍රතිචාරය සීමා කිරීමෙන් අමතර ගැටළු ඇති කරයි20. සමහර ලියුකෝසයිට් ජෛව පටල වලට විනිවිද යා හැකි බව නිරීක්ෂණය වී ඇත21 නමුත් මෙම ආරක්ෂාව අඩාල වූ පසු බැක්ටීරියා ෆාගෝසයිටෝස් කිරීමට නොහැකි වේ22. තුවාල ජෛව පටල ආසාදනයට එරෙහිව ධාරක ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරයට සහාය වීම සඳහා සමස්ත ප්‍රවේශයක් භාවිතා කළ යුතුය. තුවාලය ඉවත් කිරීම ජෛව පටලයට භෞතිකව බාධා කළ හැකි අතර ජෛව බරෙන් වැඩි ප්‍රමාණයක් ඉවත් කළ හැකි නමුත්, ඉතිරි ජෛව පටලයට එරෙහිව ධාරක ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරය අකාර්යක්ෂම විය හැකිය, විශේෂයෙන් ධාරක ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරය අවදානමට ලක් වුවහොත්. මේ අනුව, රිදී ආලේපන වැනි ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශක ප්‍රතිකාර මගින් ධාරක ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරයට සහාය විය හැකි අතර ජෛව පටල ආසාදන ඉවත් කළ හැකිය. සංයුතිය, සාන්ද්‍රණය, ද්‍රාව්‍යතාව සහ බෙදා හැරීමේ උපස්ථරය රිදීවල ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශක කාර්යක්ෂමතාවයට බලපෑම් කළ හැකිය. මෑත වසරවලදී, රිදී සැකසුම් තාක්ෂණයේ දියුණුව මෙම ආලේපන වඩාත් ඵලදායී කර ඇත9,23. රිදී ආලේපන තාක්ෂණය දියුණු වන විට, තුවාල ආසාදනය පාලනය කිරීමේදී මෙම ආලේපනවල කාර්යක්ෂමතාව සහ වඩාත් වැදගත් ලෙස, තුවාල පරිසරයට සහ සුව කිරීමට මෙම ප්‍රබල රිදී ආකාරවල බලපෑම තේරුම් ගැනීම වැදගත් වේ.
මෙම අධ්‍යයනයේ දී, අපි විවිධ in vitro සහ in vivo ආකෘති භාවිතා කරමින් ජෛව පටල වලට එරෙහිව Ag1+ අයන නිපදවන සාම්ප්‍රදායික රිදී ආලේපන සමඟ උසස් රිදී ආලේපන දෙකක කාර්යක්ෂමතාව සංසන්දනය කළෙමු. තුවාල පරිසරයට සහ ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීමට මෙම ආලේපනවල බලපෑම ද අපි තක්සේරු කළෙමු. බෙදාහැරීමේ අනුකෘතියේ බලපෑම අවම කිරීම සඳහා, පරීක්ෂා කරන ලද සියලුම රිදී ආලේපන කාබොක්සිමීතයිල්සෙලියුලෝස් වලින් සමන්විත විය.
Pseudomonas aeruginosa සහ Staphylococcus aureus වල යටත් විජිත ජෛව පටල වලට එරෙහිව මෙම රිදී ආලේපන පිළිබඳ අපගේ මූලික ඇගයීමෙන් පෙනී යන්නේ, සාම්ප්‍රදායික Ag1+ ආලේපන මෙන් නොව, උසස් රිදී ආලේපන දෙකක් වන Ag1+ + EDTA/BC සහ ඔක්සිජන් සහිත Ag ලවණ 5 කින් ඵලදායී වන බවයි. දින කිහිපයක් ඇතුළත ජෛව පටල බැක්ටීරියා ඵලදායී ලෙස මරා දමයි. ඊට අමතරව, මෙම ආලේපන ප්ලවාංග බැක්ටීරියා වලට නැවත නැවත නිරාවරණය වීමෙන් ජෛව පටල නැවත සෑදීම වළක්වයි. Ag1+ ආලේපනයේ රිදී ක්ලෝරයිඩ්, Ag1+ + EDTA/BC හා සමාන රිදී සංයෝගයක් සහ පාදක අනුකෘතියක් අඩංගු වූ අතර, එම කාලය තුළ ජෛව පටලය තුළ බැක්ටීරියා ශක්‍යතාවට සීමිත බලපෑමක් ඇති කළේය. එකම අනුකෘතියක් සහ රිදී සංයෝගයකින් සමන්විත Ag1+ ආලේපනයකට වඩා ජෛව පටලයට එරෙහිව Ag1+ + EDTA/BC ආලේපනයක් වඩාත් ඵලදායී බව නිරීක්ෂණය කිරීම, වෙනත් තැනක වාර්තා වී ඇති පරිදි, ජෛව පටලයට එරෙහිව රිදී ක්ලෝරයිඩ් වල කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කිරීමට අමතර අමුද්‍රව්‍ය අවශ්‍ය වේ යන අදහසට සහාය වේ15. මෙම ප්‍රතිඵල මගින් BC සහ EDTA සමස්ත ඇඳුම් පැළඳුම් කාර්යක්ෂමතාවයට දායක වන අතිරේක කාර්යභාරයක් ඉටු කරන බවට සහ Ag1+ ඇඳුම් පැළඳුම්වල මෙම සංරචකය නොමැති වීම in vitro කාර්යක්ෂමතාව පෙන්නුම් කිරීමට අසමත් වීමට දායක වන්නට ඇති බවට අදහසට සහාය වේ. Ag2+ සහ Ag3+ අයන නිපදවන ඔක්සිජන් සහිත Ag ලුණු ආලේපන Ag1+ ට වඩා ශක්තිමත් ප්‍රතිබැක්ටීරීය කාර්යක්ෂමතාවයක් සහ Ag1+ + EDTA/BC ට සමාන මට්ටම්වල පෙන්නුම් කළ බව අපට පෙනී ගියේය. කෙසේ වෙතත්, ඉහළ රෙඩොක්ස් විභවය නිසා, තුවාල ජෛව පටල වලට එරෙහිව Ag3+ අයන කොපමණ කාලයක් ක්‍රියාකාරීව සහ ඵලදායීව පවතින්නේද යන්න පැහැදිලි නැත, එබැවින් වැඩිදුර අධ්‍යයනය කිරීම වටී. මීට අමතරව, මෙම අධ්‍යයනයේ දී පරීක්ෂා නොකළ Ag1+ අයන ජනනය කරන විවිධ ඇඳුම් පැළඳුම් රාශියක් ඇත. මෙම ඇඳුම් පැළඳුම් විවිධ රිදී සංයෝග, සාන්ද්‍රණයන් සහ පාදක න්‍යාස වලින් සමන්විත වන අතර, ඒවා Ag1+ අයන බෙදා හැරීමට සහ ජෛව පටල වලට එරෙහිව ඒවායේ කාර්යක්ෂමතාවයට බලපෑම් කළ හැකිය. ජෛව පටල වලට එරෙහිව තුවාල ආවරණ වල කාර්යක්ෂමතාව ඇගයීම සඳහා භාවිතා කරන විවිධ in vivo සහ in vivo ආකෘති රාශියක් ඇති බව ද සඳහන් කිරීම වටී. භාවිතා කරන ලද ආකෘතියේ වර්ගය මෙන්ම මෙම ආකෘතිවල භාවිතා කරන මාධ්‍යයේ ලුණු සහ ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය, ඇඳුමේ කාර්යක්ෂමතාවයට බලපානු ඇත. අපගේ in vivo ආකෘතියේදී, අපි ජෛව පටලය in vitro තුළ පරිණත වීමට ඉඩ දී පසුව එය තුවාලයේ සම මතුපිටට මාරු කළෙමු. ධාරක මීයාගේ ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරය තුවාලයට යොදන ප්ලවාංග බැක්ටීරියා වලට සාපේක්ෂව ඵලදායී වන අතර එමඟින් තුවාලය සුව වන විට ජෛව පටලයක් සාදයි. තුවාලයකට පරිණත ජෛව පටලයක් එකතු කිරීම, පරිණත ජෛව පටලය සුව කිරීම ආරම්භ කිරීමට පෙර තුවාලය තුළ ස්ථාපිත වීමට ඉඩ දීමෙන් ජෛව පටල සෑදීමට ධාරක ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරයේ කාර්යක්ෂමතාව සීමා කරයි. මේ අනුව, තුවාල සුව වීමට පෙර පරිණත ජෛව පටල මත ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී කණ්නාඩි වල කාර්යක්ෂමතාව ඇගයීමට අපගේ ආකෘතිය අපට ඉඩ සලසයි.
ඇඳුම් පැළඳුම් ගැලපීම, අභ්‍යන්තර පටක තුළ වැඩුණු ජෛව පටල සහ ඌරු සම මත රිදී ආලේපනවල කාර්යක්ෂමතාවයට බලපාන බව අපට පෙනී ගියේය. තුවාලය සමඟ සමීප සම්බන්ධතාව, ඇඳුමේ ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශක කාර්යක්ෂමතාව සඳහා ඉතා වැදගත් යැයි සැලකේ24,25. ඔක්සිජන් සහිත Ag ලවණ අඩංගු ඇඳුම් පැළඳුම් පරිණත ජෛව පටල සමඟ සමීප සම්බන්ධතා පැවැත්වූ අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස පැය 24 කට පසු ජෛව පටලය තුළ ශක්‍ය බැක්ටීරියා සංඛ්‍යාව සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. ඊට වෙනස්ව, Ag1+ සහ Ag1+ + EDTA/BC ආලේපන සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට, සැලකිය යුතු ශක්‍ය බැක්ටීරියා සංඛ්‍යාවක් ඉතිරි විය. මෙම ඇඳුම් පැළඳුම්වල ඇඳුමේ මුළු දිග දිගේ මැහුම් අඩංගු වන අතර එමඟින් ජෛව පටලය සමඟ සමීප සම්බන්ධතා වළක්වන මළ අවකාශයන් නිර්මාණය වේ. අපගේ අභ්‍යන්තර පටක අධ්‍යයනයන්හිදී, මෙම ස්පර්ශ නොවන ප්‍රදේශ ජෛව පටලය තුළ ශක්‍ය බැක්ටීරියා විනාශ වීම වැළැක්වීය. ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පැය 24 කට පසුව පමණක් බැක්ටීරියා ශක්‍යතාව අපි තක්සේරු කළෙමු; කාලයත් සමඟ, ඇඳුම වඩාත් සංතෘප්ත වන විට, මෙම ශක්‍ය බැක්ටීරියා සඳහා ප්‍රදේශය අඩු කරමින් අඩු මළ අවකාශයක් තිබිය හැකිය. කෙසේ වෙතත්, මෙය ඇඳුමේ රිදී වර්ගය පමණක් නොව, ඇඳුමේ සංයුතියේ වැදගත්කම ඉස්මතු කරයි.
විවිධ රිදී තාක්ෂණයන්හි කාර්යක්ෂමතාව සංසන්දනය කිරීම සඳහා in vitro අධ්‍යයනයන් ප්‍රයෝජනවත් වුවද, ජෛව පටල මත මෙම ඇඳුම් පැළඳුම් වල බලපෑම in vivo තුළ තේරුම් ගැනීම ද වැදගත් වේ, එහිදී ධාරක පටක සහ ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාර ජෛව පටල වලට එරෙහිව ඇඳුම් පැළඳුම් වල කාර්යක්ෂමතාවයට දායක වේ. තුවාල ජෛව පටල මත මෙම ඇඳුම් පැළඳුම් වල බලපෑම ස්කෑන් කරන ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය සහ අන්තර් සෛලීය සහ බාහිර සෛලීය DNA ඩයි වර්ග භාවිතයෙන් ජෛව පටලයේ EPS පැල්ලම් කිරීම මගින් නිරීක්ෂණය කරන ලදී. ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් දින 3 කට පසු, ජෛව පටල ආසාදිත තුවාල වල සෛල රහිත DNA අඩු කිරීම සඳහා සියලුම ඇඳුම් පැළඳුම් ඵලදායී බව අපට පෙනී ගියේය, නමුත් Staphylococcus aureus-ආසාදිත තුවාල වලදී Ag1+ ඇඳුම අඩු ඵලදායී විය. ස්කෑන් කරන ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය රිදී ඇඳුම් සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද තුවාල වල සැලකිය යුතු ලෙස අඩු බැක්ටීරියා ඇති බව ද පෙන්නුම් කළේය, නමුත් Ag1+ ඇඳුමට සාපේක්ෂව ඔක්සිජන් සහිත Ag ලුණු ඇඳුම සහ Ag1+ + EDTA/BC ඇඳුම සමඟ මෙය වඩාත් කැපී පෙනුණි. පරීක්ෂා කරන ලද රිදී ඇඳුම් පැළඳුම් ජෛව පටල ව්‍යුහයට විවිධ මට්ටම්වල බලපෑමක් ඇති කළ බව මෙම දත්ත පෙන්නුම් කරයි, නමුත් රිදී ඇඳුම් කිසිවක් ජෛව පටලය තුරන් කිරීමට සමත් නොවූ අතර, තුවාල ජෛව පටල ආසාදන සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා පරිපූර්ණ ප්‍රවේශයක අවශ්‍යතාවයට සහාය විය; රිදී අත් පටි භාවිතය. ප්‍රතිකාරයට පෙර ජෛව පටලයෙන් වැඩි කොටසක් ඉවත් කිරීම සඳහා භෞතික විඝටනය සිදු කරනු ලැබේ.
නිදන්ගත තුවාල බොහෝ විට දරුණු දැවිල්ලක තත්වයක පවතී, අතිරික්ත ගිනි අවුලුවන සෛල තුවාල පටක තුළ දිගු කාලයක් රැඳී සිටීම නිසා පටක වලට හානි සිදු වන අතර තුවාලයේ කාර්යක්ෂම සෛලීය පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියට සහ ක්‍රියාකාරිත්වයට අවශ්‍ය ඔක්සිජන් ක්ෂය වේ26. ජෛව පටල සෛල ප්‍රගුණනය සහ සංක්‍රමණය වැළැක්වීම සහ ප්‍රෝඉන්ෆ්ලමේටරි සයිටොකයින් සක්‍රීය කිරීම ඇතුළු විවිධ ආකාරවලින් සුව කිරීමට අහිතකර ලෙස බලපාන මෙම සතුරු තුවාල පරිසරය උග්‍ර කරයි27. රිදී ආලේපන වඩාත් ඵලදායී වන විට, තුවාල පරිසරයට සහ සුව කිරීමට ඒවා ඇති කරන බලපෑම තේරුම් ගැනීම වැදගත් වේ.
සිත්ගන්නා කරුණ නම්, සියලුම රිදී ආලේපන ජෛව පටල සංයුතියට බලපෑවත්, ඔක්සිජන් සහිත රිදී ලුණු ආලේපන පමණක් මෙම ආසාදිත තුවාල නැවත එපිටිලියල්කරණය වැඩි කළේය. මෙම දත්ත අපගේ පෙර සොයාගැනීම් 17 සහ කලන් සහ තවත් අයගේ (2017) 28 සොයාගැනීම් වලට සහාය වන අතර, ඔක්සිජන් සහිත රිදී ලවණවල හොඳ ආරක්ෂාව සහ විෂ සහිත පැතිකඩ පෙන්නුම් කළේ ජෛව පටල වලට එරෙහිව රිදී සාන්ද්‍රණය අඩු බැවින් ය.
අපගේ වත්මන් අධ්‍යයනය මගින් රිදී තාක්ෂණයේ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී රිදී ආලේපන අතර වෙනස්කම් සහ තුවාල පරිසරයට සහ ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීමට මෙම තාක්ෂණයේ බලපෑම ඉස්මතු කරයි. කෙසේ වෙතත්, මෙම ප්‍රතිඵල Ag1+ + EDTA/BC ආලේපනය තුවාල වූ හාවා කන් වල සුව කිරීමේ පරාමිතීන් in vivo තුළ වැඩිදියුණු කළ බව පෙන්වන පෙර අධ්‍යයනයන්ට වඩා වෙනස් වේ. කෙසේ වෙතත්, මෙය සත්ව ආකෘති, මිනුම් වේලාවන් සහ බැක්ටීරියා යෙදුම් ක්‍රමවල වෙනස්කම් නිසා විය හැකිය29. මෙම අවස්ථාවේ දී, තුවාලයෙන් දින 12 කට පසු තුවාල මිනුම් ගනු ලැබුවේ ඇඳුමේ ක්‍රියාකාරී අමුද්‍රව්‍ය දිගු කාලයක් ජෛව පටලය මත ක්‍රියා කිරීමට ඉඩ සලසමිනි. Ag1+ + EDTA/BC සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද සායනිකව ආසාදිත කකුල් වණ මුලින් ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් සතියකට පසු ප්‍රමාණයෙන් වැඩි වූ බවත්, පසුව Ag1+ + EDTA/BC සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් පසු ඊළඟ සති 3 තුළ සහ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන භාවිතයෙන් සති 4 ක් ඇතුළත බවත් පෙන්නුම් කළ අධ්‍යයනයකින් මෙය සනාථ වේ. ඖෂධ. වණ ප්‍රමාණය අඩු කිරීම සඳහා CMC ආලේපන30.
රිදී වල ඇතැම් ආකාර සහ සාන්ද්‍රණයන් මීට පෙර විට්‍රෝ 11 තුළ සයිටොටොක්සික් බව පෙන්වා දී ඇත, නමුත් මෙම විට්‍රෝ ප්‍රතිඵල සෑම විටම විවෝ තුළ අහිතකර බලපෑම් බවට පරිවර්තනය නොවේ. ඊට අමතරව, රිදී තාක්ෂණයේ දියුණුව සහ රිදී සංයෝග සහ ඇඳුම් පැළඳුම්වල සාන්ද්‍රණයන් පිළිබඳ වඩා හොඳ අවබෝධයක් බොහෝ ආරක්ෂිත සහ ඵලදායී රිදී ඇඳුම් පැළඳුම් වර්ධනයට හේතු වී ඇත. කෙසේ වෙතත්, රිදී ඇඳුම් පැළඳුම් තාක්ෂණය දියුණු වන විට, තුවාල පරිසරයට මෙම ඇඳුම් පැළඳුම්වල බලපෑම තේරුම් ගැනීම වැදගත් වේ31,32,33. නැවත එපිටිලියල්කරණයේ වැඩිවන අනුපාතය ප්‍රෝ-ගිනි අවුලුවන M1 ෆීනෝටයිප් හා සසඳන විට ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන M2 මැක්‍රෝෆේජ්වල වැඩි අනුපාතයකට අනුරූප වන බව කලින් වාර්තා විය. රිදී හයිඩ්‍රොජෙල් තුවාල ආවරණ රිදී සල්ෆඩියාසීන් සහ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී නොවන හයිඩ්‍රොජෙල් සමඟ සංසන්දනය කරන ලද පෙර මූසික ආකෘතියක මෙය සටහන් විය34.
නිදන්ගත තුවාල අධික ලෙස දැවිල්ල පෙන්නුම් කළ හැකි අතර, අතිරික්ත නියුට්‍රොෆිල් පැවතීම තුවාලය සුව කිරීමට අහිතකර විය හැකි බව නිරීක්ෂණය වී ඇත35. නියුට්‍රොෆිල්-ක්ෂය වූ මීයන් පිළිබඳ අධ්‍යයනයක දී, නියුට්‍රොෆිල් පැවතීම නැවත එපිටිලියල්කරණය ප්‍රමාද කරයි. අතිරික්ත නියුට්‍රොෆිල් පැවතීම ප්‍රෝටීස් සහ සුපර් ඔක්සයිඩ් සහ හයිඩ්‍රජන් පෙරොක්සයිඩ් වැනි ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඔක්සිජන් විශේෂවල ඉහළ මට්ටම්වලට හේතු වන අතර ඒවා නිදන්ගත සහ මන්දගාමී සුව කිරීමේ තුවාල සමඟ සම්බන්ධ වේ37,38. ඒ හා සමානව, මැක්‍රොෆේජ් සංඛ්‍යා වැඩි වීම, පාලනය නොකළහොත්, ප්‍රමාද වූ තුවාල සුව කිරීමට හේතු විය හැක39. මැක්‍රෝෆේජ් වලට ප්‍රෝ-ගිනි අවුලුවන ෆීනෝටයිප් එකකින් ප්‍රෝ-සුව කිරීමේ ෆීනෝටයිප් එකකට සංක්‍රමණය වීමට නොහැකි නම්, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස තුවාල සුව කිරීමේ ගිනි අවුලුවන අවධියෙන් පිටවීමට අපොහොසත් වුවහොත් මෙම වැඩිවීම විශේෂයෙන් වැදගත් වේ40. සියලුම රිදී කණ්නාඩි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් දින 3 කට පසු ජෛව පටල-ආසාදිත තුවාල වල නියුට්‍රොෆිල් සහ මැක්‍රෝෆේජ් වල අඩුවීමක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු, නමුත් ඔක්සිජන් සහිත ලුණු කණ්නාඩි සමඟ අඩුවීම වඩාත් කැපී පෙනුණි. මෙම අඩුවීම රිදී වලට ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරයේ සෘජු ප්‍රතිඵලයක් විය හැකිය, ජෛව බර අඩුවීමට ප්‍රතිචාරයක් හෝ තුවාලය සුවවීමේ පසු අවධියක පැවතීම සහ එම නිසා තුවාලයේ ප්‍රතිශක්තිකරණ සෛල අඩු වේ. තුවාලයේ ඇති ගිනි අවුලුවන සෛල ගණන අඩු කිරීමෙන් තුවාල සුව කිරීමට හිතකර පරිසරයක් පවත්වා ගත හැකිය. Ag ඔක්සිලල්ට් ආසාදන-ස්වාධීන සුව කිරීම ප්‍රවර්ධනය කරන ආකාරය පිළිබඳ ක්‍රියාකාරී යාන්ත්‍රණය අපැහැදිලි නමුත්, Ag ඔක්සිලල්ට් වලට ඔක්සිජන් නිපදවීමට සහ දැවිල්ලේ මැදිහත්කරුවෙකු වන හයිඩ්‍රජන් පෙරොක්සයිඩ් හානිකර මට්ටම් විනාශ කිරීමට ඇති හැකියාව මෙය පැහැදිලි කළ හැකි අතර වැඩිදුර අධ්‍යයනයක් අවශ්‍ය වේ17.
නිදන්ගත සුව නොවන ආසාදිත තුවාල වෛද්‍යවරුන්ට සහ රෝගීන්ට ගැටලුවක් ඇති කරයි. බොහෝ ආලේපන ක්ෂුද්‍ර ජීවී නාශක කාර්යක්ෂමතාව ප්‍රකාශ කළද, පර්යේෂණ තුවාලයේ ක්ෂුද්‍ර පරිසරයට බලපාන අනෙකුත් ප්‍රධාන සාධක කෙරෙහි අවධානය යොමු කරන්නේ කලාතුරකිනි. මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ විවිධ රිදී තාක්ෂණයන්ට විවිධ ප්‍රති-ක්ෂුද්‍ර ජීවී කාර්යක්ෂමතාව සහ, වැදගත් ලෙස, ආසාදනයෙන් ස්වාධීනව, තුවාල පරිසරයට සහ සුව කිරීමට වෙනස් බලපෑම් ඇති බවයි. මෙම අභ්‍යන්තර සහ අභ්‍යන්තර අධ්‍යයනයන් තුවාල ආසාදනවලට ප්‍රතිකාර කිරීමේදී සහ සුව කිරීම ප්‍රවර්ධනය කිරීමේදී මෙම ආලේපනවල කාර්යක්ෂමතාව පෙන්නුම් කළද, සායනය තුළ මෙම ආලේපනවල කාර්යක්ෂමතාව ඇගයීමට අහඹු ලෙස පාලනය කරන ලද අත්හදා බැලීම් අවශ්‍ය වේ.
වත්මන් අධ්‍යයනයේදී භාවිතා කරන ලද සහ/හෝ විශ්ලේෂණය කරන ලද දත්ත කට්ටල සාධාරණ ඉල්ලීමක් මත අදාළ කතුවරයාගෙන් ලබා ගත හැකිය.